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Technique de Ziehl Neelsen modifiée par Henriksen et Pohlenz. (recherche de cryptosporidium)

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Technique de Ziehl Neelsen modifiée par Henriksen et Pohlenz. (recherche de cryptosporidium)

Message par pharminfo le Mer 28 Avr - 0:15:28

Cette coloration permet de voir les oocystes de Cryptosporidium de couleur rouge vif et renferment quatre sporozoites agencés autour d'un corps résiduel arrondi. Elle est indispensable pour mettre en évidence les oocystes de Cryptosporidium.

Réactifs


Carbolfuchsine
Solution A
-Fuchsine basique ..................1g
-Éthanol à 95% .....................10ml
Dissoudre en broyant dans un mortier.

Solution B
-Phénol cristallisé..................5g
-Eau distillée.........................100ml
Mélanger les solutions A et B.
Laisser reposer pendant 8 jours.
Filtrer et conserver à température ambiante.

Bleu de méthylène
-Bleu de méthylène..............0,3g
-Eau distillée........................100ml
Filtrer

Acide sulfurique à 5%.

Technique
Fixer le frottis mince de fèces par le méthanol.
Colorer pendant une heure par la solution de fuchsine.
Rincer rapidement à l'eau du robinet.
Différencier pendant 30 secondes par l'acide sulfurique.
Rincer et contre-colorer au bleu de méthylène pendant une minute, ou au vert malachite à 5 % pendant 5 minutes.
Rincer et examiner à l'immersion.




Oocystes de Cryptosporidium sp colorés par la technique de Ziehl Nielsen.
Photo: Thèse de Doctorat, 1992. Alae-eddine Gati.
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