Conduite à tenir devant un prélèvement d'urine

par vfend Sam 24 Avr - 23:22:53

I

Introduction

Les urines peuvent être infectées par plusieurs parasites : Schistosoma haematobium, Trichomonas vaginalis (cosmopolite). Les parasites rencontrés occasionnellement : Microfilaire lymphatique à Wechereria bancrofti, Loa loa, Morpion (Acarien), larves de mouches, œufs d'Oxyures, Champignons : Candida, Cryptocoque, Aspergillus, Histoplasma, Coccidiomycose (accidentels lors d'une dissémination).

II

Étude de la Bilharziose urogénitale
A. Fiche de renseignement
Elle est importante dans le diagnostic. Elle comporte : nom, prénom du malade, age, adresse, notion de baignade infestante, notion de séjour en zone d'endémie (Afrique).

B.Signes cliniques importants
Hématurie (globules rouges dans les urines), terminale et capricieuse.

C.Signes biologiques
• FNS, hyper éosinophile (Helminthiase).
• Le prélèvement destiné à la recherche de Schistosoma haematobium : deux types :
Urine
du matin de fin de miction, recueillit après avoir demandé au malade de
faire un effort modéré obtenu en sautant sur place ou de monter et
descendre les escaliers (pour détaché les œufs de la paroi)
Urine
de 24H : récolter toutes les urines de 24H dans un flacon propre, elles
doivent être traitées dés leur réception, au plus tard 20 minutes.
Examiner la totalité des urines prélevées (œufs rares), en cas d'examen
microscopique (différé), on doit ajouter le formol à 37% en raison de
1ml de formol pour 10ml d'urines, on conserve à +4°C au réfrigérateur.

D.Examen macroscopique
Présence
d'hématie, si les urines sont troubles par la présence des filaments de
mucus dû à l'inflammation et l'accrochement des œufs.

E.Examen microscopiques Lorsque
les urines sont troubles, prélevé les filaments avec une pipette et
l'examen se fait entre lame et lamelle après écrasement modéré. Dans
tout les cas : examen directe des urines après centrifugation
(préalable et nécessaire)
On centrifuge les urines : 2500tours/minutes pendant 10minutes, on jette le surnagent et on garde le culot urinaire.

F.Examen microscopique du culot Mettre une goutte du culot urinaire entre lame et lamelle et examen au grossissement x10 et x40
Résultats : Un œuf embryonné ovoïde à coque mince, de 150µ sur 60 µ, à éperon terminale.

G.Teste de vitalité miracidienne Deux techniques : à l'eau et au colorant vital.
- Technique à l'eau
Une goutte du culot entre lame et lamelle, on introduit une goutte d'eau de robinet à l'aide d'une pipette Pasteur, après 5-20 minutes on a la libération du miracidium (œuf vivant).
- Technique au colorant Vital : "Bleu Trypan".
Résultat :
- Si l'œuf se colore en bleu: œuf mort.
- Si il ne se colore pas: œuf vivant.
- Avec l'eau : œuf vivant: miracidium libéré.
- Avec le Bleu Trypan :
- Œuf vivant non coloré : Bilharziose évolutive.
- Œuf coloré : Bilharziose chronique.

H.Méthode qualitative de numération ovulaire
a.intéret
• Apprécier la charge parasitaire.
• Apprécier l'efficacité d'un traitement.
b.Matériel
- Seringue de 10ml,
- Un support filtre,
- Des pinces,
- Lame et lamelle,
- Lugol.
On prélève 10 ml d'urine après effort de miction. Adapter le support
filtre à la seringue, vider doucement jusqu'à faire passer les 10ml à
travers le filtre qui retient les œufs, on récupère le filtre qui sera
déposer sur une lame porte objet, on ajoute une goutte de Lugol, on
recouvre d'une lamelle et on observe au microscope au grossissement x10
en comptant le nombre d'œufs.
W= le nombre d'œufs de Schistosoma haematobium pour 10ml (prise d'essai)
Exemple :
- 5 oeufs -> 10ml
- Y -> volume urinaire
- Y= 5 oeufs (W) x volume urinaire / 10
c.Remarque
On peut retrouver des urines
hémorragiques, donc on ajoute au culot de centrifugation 20ml d'acide
acétique, il y aura hémolyse des globules rouges, on centrifuge et on
observe le culot.
Parfois on retrouve des urines avec des cristaux abondants, après la sédimentation on ajoute l'acide
acétique goutte à goutte jusqu'à éclaircissement, on laisse sédimenter puis observer le culot après centrifugation.
d.Interprétation des résultats
Lorsque un examen direct est négatif et le
culot urinaire est riche en polynucléaire, globules rouges et
agglomérats cellulaires de plus c'est un patient originaire d'une zone
d'endémie, ceci nécessite de renouveler l'examen ou alors compléter le
bilan de la Bilharziose avec une sérologie ou biopsie
rectale.
- Un examen négatif n'élimine pas le diagnostic d'une Bilharziose urinaire (élimination irrégulière des œufs, 6semaines)
- Un
examen positif au cours d'un traitement antiBilharzien ne signifie pas
un échec (œuf renfermé dans la muqueuse urinaire et éliminé
irrégulièrement)
On peut retrouvé aussi des œufs morts calcifiés surtout lors de contrôle poste thérapeutique.

<table class="forumline table1 bg3" border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="100%"><tr></tr></table><table class="forumline <br />table1 bg3" border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="100%"><tr></tr></table>

III

Trichomonas vaginalis

Protozoaire flagellé, recherché dans les sérosités (prélèvement vaginal chez la femme, gouttes urétrales chez l'homme), le matin, la totalité du premier jet.
Centrifuger la totalité de l'urine à 2000tours/minute et sur le culot on fait un examen direct : Une goutte entre lame et lamelle, on observe la mobilité du parasite.
On fait aussi un examen après coloration au MGG : on observe le cytoplasme en bleu, noyau et flagelles en rouge.
Si les flagelles se colorent mal, on prolonge le temps de coloration, ou on fait la fixation à l'acide osmique sous hotte
avec des lunettes.
Parfois on est obligé de faire la culture quand l'examen direct est négatif, elle se fait en milieu spécifique à 37°C (quand les signes cliniques persistes) ; les milieux utilisés : - Diphasiques de Dobell et Laidlaw,
- Monophasiques LMS,
- Axénique Diamond.

Pour l'entretien d'une souche, ces milieux sont également utilisés.



IV	Levures
	Touches essentiellement les Candidoses. <table class="forumline table1 bg3" border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="100%"><tr><td class="row3" colspan="2" width="100%"> </td></tr><tr><td class="row3" colspan="2" width="100%"> </td></tr><tr><td class="row3" valign="top"> IV.A.</td><td class="row3" width="100%"> Examen du culot urinaire après centrifugation</td></tr><tr><td class="row3" align="center" valign="center" width="7%"> </td><td class="row3" valign="top" width="93%"> Une goutte du culot plus une goutte de Bleu coton au microscope au grossissement x40. La culture du culot urinaire est obligatoire.Les milieux utilisés : Sabouraud + Chloramphénicol ou Sabouraud + Chloramphénicol + Actidione. Température : 25-30°C. Lecture se fait au bout de 24~48H. </td></tr></table> <table class="forumline table1 bg3" border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="100%"><tr><td class="row3" colspan="2" width="100%"> </td></tr><tr><td class="row3" colspan="2" width="100%"> </td></tr><tr><td class="row3" valign="top"> IV.B.</td><td class="row3" width="100%"> Examen macroscopique</td></tr><tr><td class="row3" align="center" valign="center" width="7%"> </td><td class="row3" valign="top" width="93%"> Colonies blanchâtres crémeuses. </td></tr></table> <table class="forumline table1 bg3" border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="100%"><tr><td class="row3" colspan="2" width="100%"> </td></tr><tr><td class="row3" colspan="2" width="100%"> </td></tr><tr><td class="row3" valign="top"> IV.C.</td><td class="row3" width="100%"> Examen microscopique</td></tr><tr><td class="row3" align="center" valign="center" width="7%"> </td><td class="row3" valign="top" width="93%"> Colonies entres lame et lamelle plus colorant, on observe les blastospores. </td></tr></table> <table class="forumline table1 bg3" border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="100%"><tr><td class="row3" colspan="2" width="100%"> </td></tr><tr><td class="row3" colspan="2" width="100%"> </td></tr><tr><td class="row3" valign="top"> IV.D.</td><td class="row3" width="100%"> Identification</td></tr><tr><td class="row3" align="center" valign="center" width="7%"> </td><td class="row3" valign="top" width="93%"> Un repiquage sur un milieu d'identification : PCB (pomme de terre+carotte+bile), à 27°C pendant 24H Rice cream Résultats : - PCB : fragments de gélose sur lame plus une goutte de Bleu coton plus lamelle au microscope au rossissement x40. - Rice cream : enlever le couvercle et lire directement - Filaments mycéliens+blastospores: genre Candida. - Filaments mycéliens +blastospores+chlamydospores terminales: Candida albicans. - Présence de blastospores seulement: genre autre que Candida. - Dans le premier cas il faut faire l'auxanogramme pour avoir l'espèce, plus des testes supplémentaires. - Dans le deuxième cas on peut faire le teste de blastése. - Dans le troisième cas il faut faire des testes complémentaires (auxanogramme, test à l'uréase, sensibilité à l'Actidione) Le prélèvement doit être fait en asepsie rigoureuse, toilette du périnée, les urines sont prélevées au milieu du jet. L'interprétation : - Il faut quantifier les levures à l'isolement, si c'est supérieur à 104/ml, on suspect une infection (champignon commensale) - Il faut recherché un foyer digestif ou vaginal. - Ces Candidoses n'existent qu'en présence de facteurs déclenchants : sonde, diabète non équilibré - Autre champignons en cas de dissémination. Source: Univirta</td></tr></table>